Has recibido tu vial de péptido liofilizado y ahora te encuentras delante de un polvo blanco preguntándote: “¿Y ahora qué?”. Tranquilo. La reconstitución — es decir, el paso de polvo a solución — es más sencilla de lo que parece, pero requiere un poco de atención para no arruinar el compuesto.
Si estás trabajando con TRIPLE-G (nuestro nombre para la retatrutida, por sus tres G: GLP-1, GIP, Glucagón) o con otros péptidos de la misma familia, esta guía te acompaña paso a paso — desde los materiales hasta la conservación final.
Por Qué se Liofilizan los Péptidos
La liofilización (freeze-drying) es un proceso en el que se elimina el agua de una solución peptídica mediante sublimación al vacío. En la práctica, el péptido se congela y después se “seca” en condiciones controladas. El resultado es un polvo seco y estable que conserva la estructura tridimensional de la molécula.
¿Por qué tanto esfuerzo? Las ventajas son concretas:
- Dura mucho más: el polvo se conserva durante meses o años, mientras que en solución la degradación es mucho más rápida
- Resiste el transporte: la forma seca tolera mejor las variaciones de temperatura — polvo y agua bacteriostática viajan tranquilamente a temperatura ambiente
- Dosificación precisa: el contenido del vial está predeterminado, sin incertidumbres sobre la cantidad
- Sin oxidación: sin agua, las reacciones químicas que deterioran el péptido están prácticamente detenidas
Y es precisamente aquí donde está la ventaja del TRIPLE-G en forma liofilizada respecto a las plumas premezcladas: el polvo y el agua se conservan a temperatura ambiente antes de la reconstitución. Los mezclas tú, los metes en la nevera y sabes exactamente que el producto está fresco. Sin conservantes añadidos, control total sobre la calidad. Es como elegir entre el sushi preparado al momento y el sushi envasado del supermercado.
Antes del uso, sin embargo, el péptido necesita volver a solución — un proceso que requiere un poco de atención.
Materiales Necesarios
Antes de empezar, asegúrate de tener todo a mano. No quieres tener que buscar materiales a mitad del procedimiento.
Disolvente
- Agua bacteriostática (BAC water): la mejor opción en la mayoría de los casos. Contiene un 0,9% de alcohol bencílico como conservante, que impide el crecimiento de bacterias y te permite usar la solución para múltiples extracciones a lo largo de semanas
- Agua estéril: alternativa sin conservantes, para cuando consumes todo de inmediato o en caso de sensibilidad al alcohol bencílico
- Solución salina (NaCl 0,9%): utilizada en algunos protocolos específicos, sobre todo para péptidos poco solubles en agua pura
Jeringas y Agujas
- Jeringa de insulina (U-100): de 1 ml con aguja integrada (29G o 30G) para extraer el disolvente y añadirlo al vial
- Como alternativa, jeringa de 3 ml con aguja separada (21G-25G) para volúmenes mayores de disolvente
Material Accesorio
- Toallitas impregnadas en alcohol isopropílico (alcohol swabs): para desinfectar los tapones de goma
- Guantes de nitrilo: protegen tanto a ti como a la muestra de la contaminación
- Superficie de trabajo limpia: un plano desinfectado es suficiente para la mayoría de las situaciones
- Contenedor para la eliminación de agujas (sharps container): para tu seguridad
Procedimiento de Reconstitución: Paso a Paso
Fase 1: Preparación
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Saca el vial del frigorífico (si lo conservabas en frío) y déjalo llegar a temperatura ambiente durante 15-20 minutos. Reconstituir en frío puede causar un choque térmico que altera la estructura del péptido.
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Comprueba el contenido: mira el vial a contraluz. El polvo liofilizado debería aparecer blanco o blanquecino, a menudo como un disco compacto (cake) o polvo suelto en el fondo. Si el color es amarillento, marrón o el polvo parece húmedo, el péptido podría estar degradado.
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Desinfecta el tapón de goma del vial del péptido y del vial de agua bacteriostática con una toallita impregnada de alcohol. Deja secar al aire durante 10-15 segundos.
Fase 2: Extracción del Disolvente
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Decide cuánto disolvente usar. Depende de la concentración final que quieras obtener (véase “Cálculo de la Concentración” más adelante). Un volumen típico para péptidos de 10 mg es 2 ml de agua bacteriostática, que da una concentración de 5 mg/ml (5.000 mcg/ml).
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Aspira el volumen calculado de agua bacteriostática con la jeringa. Elimina las burbujas de aire invirtiendo la jeringa con la aguja hacia arriba y empujando suavemente el émbolo.
Fase 3: Adición del Disolvente (la Fase Crítica)
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Introduce la aguja en el tapón de goma del vial del péptido, inclinándola ligeramente hacia la pared interna.
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Añade el disolvente LENTAMENTE a lo largo de la pared del vial, no directamente sobre el polvo. Este es el paso más importante de todo el procedimiento. El agua debe deslizarse por el vidrio y alcanzar el polvo suavemente, para evitar espuma y desnaturalización mecánica del péptido.
Tiempo recomendado: al menos 30-60 segundos para todo el volumen. La prisa aquí es el error más frecuente y más dañino.
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Retira la aguja del vial.
Fase 4: Disolución
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NO agites el vial. La agitación vigorosa crea fuerzas de cizallamiento que pueden desnaturalizar el péptido — es decir, romper los enlaces que mantienen unida su estructura funcional.
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Gira suavemente el vial entre los dedos, con un movimiento circular lento. Inclina el vial a 45° y gíralo: en la mayoría de los casos es suficiente.
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Si hace falta, deja reposar el vial en vertical durante 5-10 minutos y luego repite el giro suave. Algunos péptidos (como el TRIPLE-G, con su cadena lipídica C20) necesitan un poco más de tiempo para disolverse completamente.
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Verifica la disolución completa: la solución final debe ser límpida y transparente, sin partículas visibles ni turbidez. Una ligera opalescencia puede ser aceptable, pero las partículas en suspensión indican disolución incompleta o degradación.
Cálculo de la Concentración
El cálculo de la concentración tras la reconstitución es fundamental para dosificar con precisión. La fórmula es sencilla:
Concentración (mcg/ml) = Cantidad de péptido (mcg) / Volumen de disolvente (ml)
Ejemplo Práctico
Hagamos un ejemplo concreto. Un vial que contiene 10 mg (10.000 mcg) de TRIPLE-G reconstituido con 2 ml de agua bacteriostática:
Concentración = 10.000 mcg / 2 ml = 5.000 mcg/ml
Si la dosis deseada es de 500 mcg, el volumen a extraer será:
Volumen = 500 mcg / 5.000 mcg/ml = 0,1 ml = 10 unidades (en jeringa de insulina U-100)
Tabla de Referencia Rápida
Para un vial de 10 mg, variando el volumen de disolvente:
| Disolvente | Concentración | Volumen para 250 mcg | Volumen para 500 mcg | Volumen para 1000 mcg |
|---|---|---|---|---|
| 1 ml | 10.000 mcg/ml | 0,025 ml (2,5 u) | 0,05 ml (5 u) | 0,1 ml (10 u) |
| 2 ml | 5.000 mcg/ml | 0,05 ml (5 u) | 0,1 ml (10 u) | 0,2 ml (20 u) |
| 3 ml | 3.333 mcg/ml | 0,075 ml (7,5 u) | 0,15 ml (15 u) | 0,3 ml (30 u) |
Si no quieres hacer cálculos a mano, en aurapep.eu encontrarás una calculadora de dosificación gratuita: introduce la cantidad de péptido y el volumen de disolvente y obtendrás de inmediato el volumen a extraer para la dosis que necesites.
Conservación Después de la Reconstitución
Una vez reconstituido, el péptido en solución es mucho menos estable que en forma de polvo. Las reglas de conservación son importantes:
Temperatura
- Conservar a 2-8 °C (el frigorífico normal de casa funciona perfectamente). No congeles la solución reconstituida — los ciclos de congelación-descongelación causan agregación y desnaturalización.
Duración
- Con agua bacteriostática: la solución se mantiene durante 28-30 días desde la reconstitución, siempre que se mantenga la cadena de frío y se respeten los procedimientos higiénicos durante las extracciones.
- Con agua estéril: usar todo dentro de las 24-48 horas, porque sin conservante la solución queda expuesta a la contaminación.
Protección de la Luz
Conserva el vial en un lugar oscuro o envuélvelo en papel de aluminio. La luz ultravioleta acelera la degradación de los aminoácidos aromáticos presentes en la cadena peptídica.
Extracciones Múltiples
Cada vez que extraes una dosis del vial reconstituido:
- Desinfecta el tapón de goma con una toallita de alcohol
- Usa siempre una jeringa estéril nueva
- No toques la aguja con los dedos ni con superficies no estériles
- Vuelve a meter el vial en el frigorífico inmediatamente después de la extracción
Errores Comunes a Evitar
1. Verter el disolvente directamente sobre el polvo
El error más frecuente y más dañino. El chorro directo sobre el polvo crea fuerzas mecánicas que desnaturalizan el péptido y producen espuma. Siempre a lo largo de la pared del vial.
2. Agitar el vial
Agitadores, vórtex o agitación manual vigorosa están absolutamente prohibidos. Los péptidos, como todas las proteínas, son sensibles a las fuerzas de cizallamiento. Gira suavemente, nunca agites.
3. Usar un volumen de disolvente inadecuado
Demasiado poco disolvente dificulta la disolución completa y causa dosificaciones imprecisas. Demasiado disolvente diluye el péptido, obligándote a extraer volúmenes mayores con más margen de error.
4. No desinfectar el tapón
Saltarse la desinfección del tapón antes de cada acceso introduce posibles contaminantes en la solución. El alcohol bencílico del agua bacteriostática ofrece protección parcial, pero no sustituye una correcta higiene.
5. Dejar a temperatura ambiente
Los péptidos reconstituidos se degradan rápidamente a temperatura ambiente. Incluso periodos breves fuera del frigorífico (mas de 30 minutos) pueden comprometer la estabilidad. Extrae y vuelve a guardar el vial a 2-8 °C de inmediato.
6. Congelar la solución reconstituida
A diferencia del polvo liofilizado, la solución reconstituida no debe congelarse. Los cristales de hielo dañan la estructura del péptido y producen agregados inactivos.
7. Reutilizar las jeringas
Cada extracción debe hacerse con una jeringa estéril nueva. Las jeringas reutilizadas introducen contaminantes y pueden contener residuos que alteran la dosificación.
Resolución de Problemas
El polvo no se disuelve completamente
- Espera 15-20 minutos a temperatura ambiente y repite el giro suave
- Verifica que el disolvente sea el correcto (agua bacteriostática o estéril)
- No fuerces con agitación mecánica
- Si después de 30 minutos siguen quedando partículas visibles, el péptido podría estar degradado
La solución está turbia
- Una ligera opalescencia durante la disolución es normal y transitoria
- La turbidez persistente indica agregación o degradación
- No uses soluciones persistentemente turbias cuando necesites dosificación precisa
Se ha formado espuma
- Deja el vial en vertical hasta que la espuma desaparezca por completo (5-15 minutos)
- La espuma indica desnaturalización parcial en la superficie, pero el péptido en solución podría seguir siendo funcional
- La próxima vez, ve aún más despacio con la adición del disolvente
Notas Específicas para Péptidos GLP-1
Los péptidos de la clase GLP-1 (semaglutida, tirzepatida, retatrutida/TRIPLE-G) tienen algunas características específicas en la reconstitución:
- Solubilidad: generalmente buena en agua a pH neutro. El agua bacteriostática estándar funciona perfectamente.
- Sensibilidad al pH: la estabilidad óptima es a pH 7,0-7,5. El agua bacteriostática comercial tiene típicamente pH 4,5-7,0, que es aceptable.
- Cadena lipídica: la cadena grasa presente en la semaglutida y en el triple agonista (que sirve para la unión a la albúmina y la larga duración de acción) puede ralentizar un poco la disolución. Es normal — dale tiempo a la molécula.
- Volumen recomendado: para viales de 5-10 mg, un volumen de 1-2 ml es generalmente apropiado para obtener concentraciones prácticas.
Resumen Rápido
- Lleva el péptido a temperatura ambiente (15-20 min)
- Desinfecta los tapones con alcohol
- Aspira el volumen de disolvente calculado
- Añade lentamente a lo largo de la pared del vial (30-60 seg)
- Gira suavemente — nunca agites
- Verifica la disolución completa (solución límpida)
- Conserva a 2-8 °C, en la oscuridad
- Usa dentro de 28 días (BAC water) o 48 horas (agua estéril)
La reconstitución correcta es el primer paso para obtener resultados fiables. Invertir unos minutos más en esta fase te compensa en precisión de dosificación y optimización de los recursos. Para quienes deseen profundizar en el protocolo del TRIPLE-G, en aurapep.eu encontrarás guías detalladas y una calculadora de dosificación gratuita.
Referencias
- Peptide Sciences. “Reconstitution and Handling of Lyophilized Peptides.” Technical Bulletin, 2023.
- Manning MC, et al. “Stability of protein pharmaceuticals: an update.” Pharm Res. 2010;27(4):544-575.
- Wang W. “Instability, stabilization, and formulation of liquid protein pharmaceuticals.” Int J Pharm. 1999;185(2):129-188.
- Chang LL, Pikal MJ. “Mechanisms of protein stabilization in the solid state.” J Pharm Sci. 2009;98(9):2886-2908.
- USP <797>. “Pharmaceutical Compounding — Sterile Preparations.” United States Pharmacopeia, 2023.
La información contenida en este artículo está destinada exclusivamente a fines educativos e informativos. No constituye consejo médico, diagnóstico ni tratamiento. Los péptidos descritos son objeto de investigación científica y no están aprobados para uso terapéutico fuera de ensayos clínicos autorizados. Consulta siempre a un profesional sanitario cualificado.
Preguntas Frecuentes
¿Cómo se reconstituye correctamente un péptido liofilizado?
El proceso consiste en añadir agua bacteriostática lentamente a lo largo de la pared interna del vial, nunca directamente sobre el polvo. Se recomienda emplear al menos 30-60 segundos para todo el volumen. Después, se gira suavemente el vial sin agitarlo nunca. La solución final debe ser límpida y transparente, sin partículas visibles.
¿Qué diferencia hay entre agua bacteriostática y agua estéril para reconstituir péptidos?
El agua bacteriostática contiene un 0,9% de alcohol bencílico que impide el crecimiento de bacterias, permitiendo usar la solución durante 28-30 días con múltiples extracciones. El agua estéril no tiene conservante y debe usarse dentro de las 24-48 horas. Para la mayoría de los protocolos, el agua bacteriostática es la opción recomendada.
¿Cuánto disolvente debo usar para reconstituir un vial de 10 mg de péptido?
Un volumen típico para viales de 10 mg es 2 ml de agua bacteriostática, lo que da una concentración de 5.000 mcg/ml. Si la dosis deseada es de 500 mcg, el volumen a extraer sería 0,1 ml (10 unidades en jeringa de insulina U-100). Para más detalles, consulta la guía de conservación de péptidos.
¿Cuánto dura un péptido reconstituido en la nevera?
Con agua bacteriostática, la solución se mantiene estable durante 28-30 días a 2-8 °C. Con agua estéril, solo 24-48 horas. Es fundamental no congelar la solución reconstituida, protegerla de la luz y apuntar la fecha de reconstitución en el vial. Cada extracción debe hacerse con jeringa estéril nueva y desinfectando el tapón.
¿Dónde puedo conseguir péptidos liofilizados de calidad para investigación?
La calidad del péptido es el primer paso para una reconstitución exitosa. Aura Peptides es un proveedor europeo verificado que ofrece péptidos liofilizados research-grade con pureza HPLC ≥98%, COA incluido y envío gratuito en la UE. También disponen de una calculadora de dosificación gratuita en su web.
